Caracterización de los antígenos y anticuerpos eritrocitarios en pacientes en espera de trasplante renal / Red blood cell antigens and antibodies in patients awaiting renal transplantation

Introducción: la importancia de los grupos sanguíneos para la terapia transfusional y el trasplante es bien conocida. La presencia de anticuerpos eritrocitarios puede mediar reacciones transfusionales hemolíticas severas y rechazo de trasplante. Objetivo: caracterizar los antígenos y anticuerpos eritrocitarios en pacientes en espera de trasplante renal.Métodos: se realizó un estudio prospectivo en 980 pacientes en espera de trasplante renal considerados aptos para trasplante, en el periodo comprendido entre julio de 2013 y julio de 2014. Se investigó la frecuencia de los grupos sanguíneos ABO, Rh (DCcEe), Kell (K), Duffy, Kidd y Lewis y se realizó la pesquisa de auto y de aloanticuerpos eritrocitarios a través de las prueba de antiglobulina directa e indirecta (Coombs) y la técnica de polietilenglicol. Resultados : el grupo sanguineo 0 fue el más frecuente, seguido del A, el B y el AB. Dentro de los fenotipos RhD positivos, el DCCee predominó en los individuos blancos y el Dccee en los no blancos. El RhD negativo (ccee) fue más frecuente en blancos que en no blancos. La distribucion del antigeno Kell fue similar en ambos grupos. Se identificaron 14 pacientes (1,4 por ciento) con prueba de Coombs directa positiva, y aloanticuerpos eritrocitarios en 35 pacientes, para una frecuencia de aloinmunización eritrocitaria del 3,6 por ciento. Predominaron los anticuerpos anti - Rh y contra el antigeno Kell. La técnica de polietilenglicol detectó un mayor número de anticuerpos que la PAI, especialmente contra el antigeno RhD, aunque la comparación no fue estadisticamente significatica. Conclusiones: la frecuencia de aloinmunización eritrocitaria es menor que las comunicadas en otros estudios y se relacionó con los antecedentes transfusionales. Se recomienda realizar la pesquisa de auto y aloanticuerpos eritrocitarios a todos los pacientes con enfermedad renal crónica en lista de espera de trasplante(AU)

Introduction: The importance of blood groups in transfusion therapy and transplant is very well known. The presence of red blood cell antibodies can mediate severe hemolytic transfusion reactions and transplant rejection. Objective: To characterize red blood cell antigens and antibodies in patients awaiting renal transplantation. Methods: A prospective study in 980 patients in waiting list for renal transplantation in the period from July, 2013 to July, 2014 was carried out. The frequency of ABO, Rh (DCcEe), Kell (K), Duffy, Kidd and Lewis blood groups, and the screening of red blood cells auto and alloantibodies by the direct and indirect antiglobulin test (Coombs) and the polietilenglicol technique were investigated. Results: Blood group O was the most frequent followed by A, B and AB. DCCee phenotype was frequent in white individuals and Dccee in non-white. RhD negative (ccee) was more frequent in whites than in non-whites. Distribution of Kell antigen was similar in both groups. Direct antiglobulin test was positive In 14 patients (1,4 percent) and red blood cell alloantibodies were identified in 35 patients for a frequency of alloimmunization of 3,6 percent. Anti-Rh anti-K antibodies were the alloantibodies most frequently identified. The polietilenglicol technique detected a higher number of antibodies than the indirect antiglobulin test, specially against RhD antigen, although the comparison was not statistically significant. Conclusions: The frequency of alloimmunization is smaller than those communicated in other studies which was related to transfusion records. A periodic red blood cell auto and alloantibodies screening is recommended in all patients awaiting renal transplantation(AU)

Evolución de la nomenclatura de los factores del sistema de antígenos leucocitarios humanos / Nomenclature evolution for factors of human leukocyte antigen system

La nomenclatura del sistema de antígenos leucocitarios humanos (HLA, del inglés human leukocyte antigens) ha sido objeto de numerosas modificaciones según se han descubierto y caracterizado sus factores. Los avances en el campo de la biología molecular motivaron las variaciones nominales más importantes en el llamado complejo principal de histocompatibilidad (MHC, del inglés major histocompatibility complex). En la actualidad, un nombre de alelo se forma por el prefijo HLA, seguido por un guión (-) y luego el nombre del gen A, B, C, DP, DQ o DR. Después del encabezamiento se coloca un asterisco (*) como separador y cuatro campos numéricos delimitados entre sí por dos puntos (:). El primer campo describe el grupo del alelo, que corresponde frecuentemente con la denominación serológica; y el segundo campo indica la proteína específica. Los alelos que difieren solo por sustituciones de nucleótidos sinónimos en la secuencia codificadora se muestran en un tercer campo; los que solo presentan diferencias en una región no codificadora, se precisan por el cuarto campo. Se puede incorporar además, un sufijo para indicar el estado de expresión del alelo: N para nulo, L para bajo, S para secretado sin expresión en membrana, C para citoplasmático, A para aberrante por dudas en la expresión del antígeno y Q para cuestionable, en el caso de mutaciones que afecten los niveles normales de expresión

The nomenclature for the Human Leukocyte Antigen (HLA) system has been modified as its factors were been discovered and characterized. The progress in the molecular biology field led the most important nominal changes in the so call Major Histocompatibility Complex (MHC). At present, an allele name is formed by the prefix HLA followed by a hyphen (-) and the name of the gene A, B, C, DP, DQ or DR. After the lead an asterisk (*) is used as a separator and it is followed by four numeric fields delimited each other by two colons (:). The first field describes the allele group and frequently corresponds with the serology name, and the second field indicates the specific protein. The third field shows a synonymous nucleotide substitution; the fourth one shows differences in a non-coding region. Suffixes could be used to denote changes in the antigen expression: N for null, L for low, S for secreted without membrane expression, C for cytoplasmatic, A for aberrant, when doubts in the expression; and ®Q for questionable, in case of mutations that could affect the normal expression levels

La hemovigilancia de las reacciones adversas a la donación de sangre / Hemovigilance of adverse reactions to blood donation

Introducción: en la provincia de Matanzas, de enero del 2003 a diciembre de 2011, se desarrolló un programa de hemovigilancia para incrementar la seguridad de la cadena transfusional. Objetivo: analizar los efectos de este programa sobre las reacciones adversas en los donantes de sangre. Métodos: Se identificó el estado de la notificación de los eventos adversos de la donación en el año 2002, etapa previa al programa. Se mejoró el servicio de donaciones con la revisión de los procederes y las buenas prácticas; a la metodología para la selección del donante se incorporaron los datos geográficos epidemiológicos de cada territorio. A partir de 2003, se notificaron las reacciones adversas de la donación mediante un formulario diseñado para ese fin, se analizaron sus causas, se tomaron las medidas preventivas y correctivas pertinentes. Se efectuaron acciones para prevenir estas y mejorar la calidad de la colecta como capacitación y consejería a los donantes. Se organizó un sistema de alerta rápida para detectar y minimizar los riesgos relacionados con la donación y la calidad de la colecta. Resultados: se disminuyó la tasa de reacciones del donante de 10,1 por mil donaciones en 2002 a 1,4 por mil donaciones en 2011. Se eliminaron las reacciones graves y se minimizaron las moderadas. La reacción más frecuente fue la vasovagal leve. Conclusiones: la hemovigilancia es una herramienta eficaz para incrementar la seguridad de los donantes y mejorar la calidad de la colecta de sangre y puede implementarse con escasos recursos

Introduction: from January 2003 to December 2011 a program of hemovigilance was developed to increase the safety of transfusion in the province of Matanzas. Objective: to analyze the effects of this program on the adverse reactions of blood donors. Methods: adverse reactions to blood donation were identified in 2002 prior to the introduction of the program. The donation service was improved with the revision of procedures and standard practice; epidemiological and geographic data was included in the donor's selection process. From 2003 on, the adverse reactions to donations were notified using a form specially designed; causes were analyzed and prevention and corrective actions were taken. Other proceedings were applied to prevent negative reactions at donation and to improve the quality of blood collection, such as training and advice to donors. A quick alert system was set up to detect and to correct the risks related to donation and the quality of the collection. Results: there was a decrease on the donor's reaction rate from 10, 1 out of 1 000 donations in 2002 to 1,4 out of 1000 in 2011. Severe adverse reactions were eliminated and moderate reactions were minimized. The most frequent was the vasovagal reaction. Conclusions: hemovigilance is an effective tool to increase donors' safety and to improve the quality of blood collection and it can be implemented with scarce resources

Concentración de autoanticuerpos IgG en hematíes y respuesta al tratamiento en la anemia hemolítica autoinmune / Concentration of IgG autoantibodies on red blood cells and response to treatment in autoimmune hemolytic anemia

Introducción: no existen suficientes evidencias que relacionen la respuesta al tratamiento con el patrón de autoanticuerpos o su concentración en los hematíesde los pacientes con anemia hemolítica autoinmune. Objetivo: en este trabajo se investigó la asociación entre la respuesta al tratamiento y la remisión de la enfermedad con la concentración de autoanticuerpos IgG en los hematíes al inicio de la enfermedad. Métodos: se realizó un estudio retrospectivo de 44 pacientes adultos con anemia hemolitica autoinmune caliente idiopática por presencia únicamente de autoanticuerpos IgG donde se relacionó la respuesta al tratamiento con el patrón de inmunoproteínas en los hematíes, la concentración de autoanticuerpos IgG en los hematíes, las cifras de hemoglobina y el conteo de reticulocitos. Resultados: no se observó asociación entre el patrón de inmunoproteínas en los hematíes, las cifras de hemoglobina, el conteo de reticulocitos y la cuantificación de IgG en los hematíes, con la respuesta al tratamiento con prednisona, la administración de tratamiento de segunda línea ni con la remisión de la enfermedad, aunque el número de moléculas de IgG por hematíe fue 1,4 veces superior en los pacientes sin remisión en relación con los casos con remisión de la enfermedad. Conclusiones: el patrón de inmunoproteínas en los hematíes, las cifras de hemoglobina, el conteo de reticulocitos y la cuantificación de IgG en los hematíes al inicio de la enfermedad, no es un marcador pronóstico de respuesta al tratamiento

Introduction: there is not enough evidence that relates the response to treatment with the pattern of autoantibodies or their concentration on red blood cells in patients with autoimmune hemolytic anemia. Objective: to investigate the association of the response to treatment and the remission of the disease with the concentration of IgG autoantibodies on red blood cells at the beginning of the disease. Methods: a retrospective study in 44 adult patients with idiopathic warm autoimmune hemolytic anemia with only IgG autoantibodies was carried out in order to relate the response to treatment to the immunoprotein pattern of red blood cells, the IgG autoantibodies concentration on red blood cells, the hemoglobin level and the reticulocyte count. Results: association was not observed between the immunoprotein pattern, the hemoglobin level, the reticulocyte count and the quantitation of IgG on red blood cells, with the response to treatment with prednisone, administration of second-line treatment and the remission of the disease; although, the number of IgG molecules on red blood cells was 1,4 times higher in patients with no remission of the disease to those with remission. Conclusions: the immunoprotein pattern, the hemoglobin level, the reticulocyte count and the quantitation of IgG on red blood cells at the beginning of the disease are not a prognostic marker of the response to treatment

Detección de autoanticuerpos antiplaquetarios por ELISA en pacientes con púrpura trombocitopénica autoinmune / Detection of antiplatelet autoantibodies by ELISA in patients with autoimmune thrombocytopenic purpura

La presencia de autoanticuerpos antiplaquetarios de los isotipos IgG, IgA e IgM en pacientes con púrpura tromobocitopénica autoinmune, así como, la distribución del patrón de inmunoglobulinas asociadas a las plaquetas en las fases aguda y crónica de la enfermedad. Objetivo: determinar la presencia de autoanticuerpos antiplaquetarios en pacientes con púrpura trombocitopénica autoinmune. Método: se realizó un estudio a través de un ELISA directo cualitativo en 100 pacientes. De ellos 66 con púrpura trombocitopénica idiopática, 47 clasificados como púrpura trombocitopénica idiopática crónico y 19 como púrpura trombocitopénica idiopática aguda. Se investigaron además 34 muestras de pacientes con trombocitopenia asociada a hemopatías malignas y a enfermedades autoinmunes. Resultados: se detectaron autoanticuerpos anti-plaquetarios en el 86.6 % de los pacientes en fase aguda y en el 85.1 % de los pacientes en fase crónica de la enfermedad. Se obtuvieron resultados negativos en todos los casos que se encontraban en remisión de la enfermedad. Los autoanticuerpos de la clase IgG fueron los más encontrados. Los IgM fueron más frecuentes en los pacientes con enfermedad aguda y los IgA en los casos de enfermedad crónica. Conclusiones: el ELISA empleado es un método novedoso útil para el diagnóstico inmunohematológico de esta enfermedad, que permite además detectar todos los isotipos de los autoanticuerpos involucrados en la destrucción inmune de las plaquetas.

The presence of antiplatelet autoantibodies of the IgG, IgA and IgM isotypes in patients with autoimmune thrombocytopenic purpura, as well as the distribution of the immunoglobulin pattern associated with platelets during acute and chronic disease. Objective: to determine the presence of antiplatelet autoantibodies in patients with autoimmune thrombocytopenic purpura. Method: the study was conducted through a direct qualitative ELISA in 100 patients. From them 66 with idiopathic thrombocytopenic purpura, 47 classified as chronic idiopathic thrombocytopenic purpura and 19 as acute idiopathic thrombocytopenic purpura. In addition 34 samples from patients with thrombocytopenia associated with malignant hemopathies and autoimmune diseases. Results: antiplatelet autoantibodies in the 86.6 % of patients in acute phase and in the 85.1 % of patients in chronic phase of the disease were detected. Negative results in all cases that were in remission of the disease were obtained. The autoantibodies of the IgG class were the most discovered. The IgM were more frequent in patients with acute disease and IgA in cases of chronic disease. Conclusions: this kind of ELISA is a useful novel method for the immunohematologic diagnostic of this disease, which may also detect all isotypes of autoantibodies involved in the immune destruction of platelets.

Desarrollo de la Inmunohematología en el Instituto de Hematología e Inmunología / Development of the immunohematology in the Institute of Hematology and Immunology

El desarrollo de la Inmunohematología en el Instituto de Hematología e Inmunología en los últimos años se ha caracterizado por la introducción de los anticuerpos monoclonales hemoclasificadores y de nuevos ensayos para profundizar y optimizar el diagnóstico inmunohematológico, así como elevar el nivel científico de profesionales y técnicos vinculados con la especialidad. Los resultados más relevantes se obtuvieron en la generación de anticuerpos monoclonales y en el estudio de los auto y aloanticuerpos eritrocitarios y plaquetarios. Se ha destacado también la labor como Laboratorio de Referencia en Inmunohematología, así como los aportes a la docencia en medicina transfusional. Las proyecciones futuras de trabajo deberán estar encaminadas a la introducción de las técnicas moleculares en Inmunohematología y a profundizar en el estudio de los anticuerpos contra leucocitos y plaquetas

The development of the Immunohematology in the Institute of Hematology and Immunology in past years has been characterized by the introduction of hemoclassifying monoclonal antibodies and of new trials to deepen and to optimize the immunohematologic diagnosis, as well as to raise the scientific level of the professionals and technicians linked to specialty. The more relevant results were achieved in monoclonal antibodies generation and in the study of the erythrocyte and platetelet alloantibodies and autoantibodies. The work as Immunohematology Reference Laboratory has been emphasized as well as the contributions to transfusion medicine teaching. The future work projections must to be directed to introduction of molecular techniques in Immunology and to deepen in the study of antibodies to leukocytes and platelets

Desarrollo de la Medicina Transfusional en el Instituto de Hematología e Inmunología en el período 1996-2010 / Development of the transfusion medicine in the Institute of Hematology and Immunology during 1996-2010

El desarrollo de la Medicina Transfusional en el Instituto de Hematología e Inmunología en los últimos 15 años, se ha caracterizado por el logro de resultados relevantes en aspectos metodológicos, técnico-investigativos y de desarrollo de los recursos humanos, como son: la actualización y distribución de procederes para bancos de sangre, servicios de transfusiones y de guías clínicas para el uso de los componentes de la sangre en todo el país; la implementación del sistema de gestión de la calidad y automatización en los bancos de sangre; la introducción de técnicas moleculares para el pesquisaje viral de donantes de sangre; la introducción de anticuerpos monoclonales hemoclasificadores de producción nacional; el desarrollo de investigaciones multicéntricas sobre aspectos socioculturales relacionados con la donación de sangre y el pesquisaje de agentes infecciosos en pacientes politransfundidos; la obtención y procesamiento de células madre hematopoyéticas de sangre periférica para trasplante y medicina regenerativa, así como el desarrollo de la hemovigilancia. Las proyecciones de trabajo deberán estar encaminadas a la creación de un banco de células progenitoras de cordón umbilical para uso clínico, la obtención y producción nacional de concentrados de factores de la coagulación para uso terapéutico y el desarrollo de un programa nacional de hemovigilancia

The development of the Transfusion Medicine in the Institute of Hematology and Immunology in past 15 years, has been characterized by the achievement of relevant results in the methodological, technical-research and of the development or human resources features including: the updating and distribution of procedures for the blood banks; transfusion services and of clinical guidances for the use of blood components in all the country; the implementation of the quality management system and the blood banks automation, the introduction of molecular techniques for the viral screening of blood donors; the introduction of hemoclassifying monoclonal antibodies of national production, the development of multicenter researches on the sociocultural features related to blood donation and the screening of infectious agents in poly-transfused patients; the obtaining and processing of hematopoietic stem cells of peripheral blood for transplantation and regenerative medicine, as well as the development of the hemo-surveillance. The work projections must to be aimed to creation of a bank of progenitor cells from the umbilical cord to clinical use, the achievement and national production of coagulation factor concentrates to therapeutic use, and the development of a national program of hemo-surveillance

Reacciones adversas del imatinib como droga de segunda línea en pacientes con leucemia mieloide crónica / Adverse reactions to imatinib as second-line drug in patients with chronic myeloid leukemia

El imatinib es un inhibidor sintético de la tirosina cinasa usado en el tratamiento de la leucemia mieloide crónica (LMC) y considerado como la droga de primera línea para el tratamiento de la enfermedad. Los efectos adversos más comunes son: náuseas, dolores musculoesqueléticos, diarrea, erupción cutánea, fatiga y mielosupresión, a expensas, fundamentalmente, de la línea granulopoyética. Se realizó un estudio en 43 pacientes adultos (23 femeninos y 20 masculinos) con LMC Ph+ en fase crónica, atendidos en el Instituto de Hematología e Inmunología y en otros servicios de hematología del país. Todos los casos presentaron resistencia o intolerancia al tratamiento con interferón alfa recombinante (INFα) y recibieron terapia con imatinib (400mg/día) en el período comprendido entre abril del 2003 hasta julio del 2008. El 48,8 por ciento de los pacientes no tuvieron reacciones adversas. Dentro de los efectos adversos no hematológicos, los más frecuentes fueron: 23,3 por ciento dolores óseos, musculares o ambos; 23,3 por ciento edemas; 20,9 por ciento hipopigmentación de la piel; y 11,6 por ciento nódulos subcutáneos. Dentro de las reacciones hematológicas, en el 14 por ciento se diagnosticó la anemia hemolítica inmune por droga; en el 11,6 por ciento la trombocitopenia inmune por droga; y en el 9,3 por ciento bicitopenia

Imatinib is a synthetic inhibitor of kinase-tyrosine used in the treatment of chronic myeloid leukemia (CML) and also is considered as the first-line drug for the treatment of this entity. The commonest side effects include: nausea, musculoskeletal pains, diarrhea, cutaneous eruption, fatigue and myelosuppression mainly at the expense of granulopoiesis line. A study was conducted in 43 adult patients (23 females and 20 males) presenting with CML pH+ in chronic phase, seen in the Hematology and Immunology Institute and in other Hematology services in our country. All cases showed resistance and intolerance to treatment with recombinant Alfa-Interferon (INFα) and Imatinib therapy (400 mg/day) from April, 2003 to July, 2008. The 48,8 percent of patients have not adverse reactions. The more frequent non-hematologic side effects include bone, muscular or both pain (23 percent), edema (23,3 percent); skin hypopigmentation (20,9 percent), and subcutaneous nodules (11,6 percent). In hematological reactions are included the drug-hemolytic anemia (14 percent) drug-immune anemia, drug immune thrombocytopenia (11,6 percent) and bicitopenia ( 9,3 percent)

Relación entre hemólisis con la presencia y cuantificación de inmunoglobulinas en hematíes, en la anemia hemolítica autoinmune / Relation between hemolysis with presence and quantification of immunoglobulin in red blood cells in cases of autoimmune hemolytic anemia

Se realizó estudio en 135 pacientes: 111 adultos y 24 niños con anemia hemolítica autoinmune caliente (AHAIC). La caracterización de los autoanticuerpos eritrocitarios y el número de moléculas de inmunoglobulinas por hematíe se determinó en un ELISA. En 51 pacientes se investigó, además, el patrón de subclases de IgG. La intensidad de la hemólisis se clasificó por la concentración de hemoglobina, el conteo de reticulocitos y las cifras de haptoglobina plasmática. En los pacientes con hemólisis de alto grado se detectaron autoanticuerpos IgM en combinación con los isotipos IgG, IgA. En los casos con presencia únicamente de IgG, el número de moléculas de autoanticuerpos por hematíe fue el factor determinante en la hemólisis. No se observaron diferencias en relación con el patrón de subclases. La severidad de la hemólisis en la AHAIC está en relación con la coexistencia de múltiples inmunoglobulinas en los hematíes y en especial de la IgM

A group of 135 patients was studied: 111 adults and 24 children presenting hot autoimmune hemolytic anemia (HAIHA) The erythrocyte characterization and the number of immunoglobulin molecules by red blood cells was determined by ELISA. In 51 patients the pattern of IgG subclasses was investigated. The hemolysis intensity was classified by the hemoglobin concentration, the reticulocytes count and the figures of plasma haptoglobin. In patients presenting with high degree hemolysis IgM autoantibodies were detected in combination with IgG, IgA isotypes. In cases only with the presence of IgG, the number of molecules of autoantibodies by red blood cells was the determinant factor in hemolysis. There were not differences in relation to subclasses pattern. The severity of hemolysis in HAIHA is related to the coexistence of multiple immunoglobulins in red blood cells and especially of the IgM

Detección y cuantificación de autoanticuerpos en los hematíes de pacientes con anemia hemolítica autoinmune con prueba de Coombs negativa / Detection and quantification of auto antibodies in red blood cells from patients with autoimmune hemolytic anemia and negative Coombs test

Se estudiaron 18 pacientes: 15 adultos y 3 niños, con Anemia Hemolítica y sospecha de etiología inmune donde se observó una respuesta favorable al tratamiento con Prednisona. Todos los pacientes habían mostrado resultados negativos en la prueba de antiglobulina directa e indirecta (Coombs). A las muestras de sangre se les realizó la Técnica de Polibreno Directa (TPD), la Detección de Autoanticuerpos en el Eluato de los Hematíes en la Técnica de Microplacas (Mp), así como también la Cuantificación de Autoanticuerpos asociados a los hematíes a través de un ELlSA. Los pacientes investigados representaron el 13.3 por ciento del total de casos de AHAI diagnosticados en el período de estudio. La TPD detectó los anticuerpos en 5 casos (28 por ciento), la Mp resultó positiva en 11 pacientes (61 por ciento) y el ELlSA demostró autoanticuerpos en todos los pacientes. El ELlSA reveló la presencia de autoanticuerpos IgG en 17 casos (94,4 por ciento), de IgA en 8 pacientes (44,4 por ciento) y de Ig M en un caso (5,5 por ciento). En 10 pacientes (55,5 por ciento) la cuantificación de autoanticuerpos Ig G se comportó en una rango de 200 a 460 moléculas por hematíe y en el resto se obtuvieron valores superiores a 900 moléculas por hematíe. Los resultados muestran que el ELlSA aplicado es particularmente útil para la detección y cuantificación de autoanticuerpos en los hematíes de los pacientes con AHAI con prueba de Coombs negativa y nos provee de un procedimiento para el diagnóstico inmunohematológico de esta identidad.

Detección y cuantificación de autoanticuerpos en los hematíes de pacientes con anemia hemolítica autoinmune con prueba de Coombs negativa / Detection and quantification of autoantibodies in the red cells of patients with Coombs negative autoimmune hemolytic anemia

Se estudiaron 18 pacientes, 15 adultos y 3 niños, con anemia hemolítica y sospecha de etiología inmune, en los cuales se observó una respuesta favorable al tratamiento con prednisona . Todos los pacientes habían mostrado resultados negativos en la prueba de antiglobulina directa e indirecta (Coombs). A las muestras de sangre se les realizó la técnica de polibreno directa (TPD), la detección de autoanticuerpos en el eluato de los hematíes en la técnica de microplacas ( Mp ), así como la cuantificación de autoanticuerpos asociados con los hematíes mediante un ELISA. Los pacientes investigados representaron el 13,3 por ciento del total de casos de AHAI diagnosticados en el período de estudio. La TPD detectó los anticuerpos en 5 casos (28 por ciento), la Mp resultó positiva en 11 pacientes (61 por ciento) y el ELISA demostró autoanticuerpos en todos los pacientes. El ELISA reveló la presencia de autoanticuerpos IgG en 17 casos (94,4 por ciento), de IgA en 8 pacientes (44,4 por ciento) y de IgM en un caso (5,5 por ciento). En 10 pacientes (55,5 por ciento) la cuantificación de autoanticuerpos IgG se comportó en un rango de 200 a 460 moléculas por hematíe y en el resto se obtuvieron valores superiores a 900 moléculas por hematíe. Los resultados muestran que el ELISA aplicado es particularmente útil para la detección y cuantificación de autoanticuerpos en los hematíes de los pacientes con AHAI con prueba de Coombs negativa y nos provee de un procedimiento para el diagnóstico inmunohematológico de esta identidad

Anemia hemol¡tica autoinmune caliente. Estudio de 183 pacientes / Warm reactive autoimmune hemolytic anemia. Study of 183 cases

Se diagnosticaron 183 pacientes con AHAC, 125 adultos y 58 ni¤os, en el Instituto de Hematolog¡a e Inmunolog¡a de Ciudad de La Habana, Cuba, entre enero de 1990 y septiembre de 1999. La presencia de IgG y de C3 en los hemat¡es fue el patr¢n más com£n y en menores frecuencias se observaron autoanticuerpos de los isotipos IgA e IgM. Se encontr¢ un incremento significativo del patron C3 en los ni¤os en relaci¢n con los adultos y en los ni¤os con AHAC idiopática con respecto a los de AHAC secundaria. En los pacientes con hem¢lisis grave predominaron las combinaciones de IgG y C3 asociado a IgA e IgM. Se detect¢ un 15 por ciento y un 3 por ciento de aloinmunizaci¢n eritrocitaria en los pacientes adultos y pediátricos, respectivamente. No se demostraron diferencias en los patrones de inmunoprote¡nas en los hemat¡es entre los pacientes adultos y pediátricos, excepto un aumento de la frecuencia del patr¢n C3 en estos £ltimos. La hem¢lisis grave se asoci¢ a la presencia de m£ltiples clases de autoanticuerpos.

Estabilidad del producto hemoclasificador Hemo-CIM® Anti-B: Evaluación durante 2 años / Stability of the Anti-B Hemo-CIM® hemoclassifier product: A 2-year evaluation

Los estudios de estabilidad de los reactivos frabricados a partir de anticuerpos monoclonales de origen murino, permiten establecer adecuadamente la vida de estos productos, y su realización constituye un requisito indispensable en el cumplimiento de las buenas prácticas de producción. Se usaron los métodos de hemaglutinación para medir la actividad biológica del producto Hemo-CIM® Anti-B expresada en la potencia, la avidez y la intensidad, frente a un panel de eritrocitos del grupo B y A1B, para demostrar más efectivamente cualquier deterioro del reactivo. Se estableció que la vida útil del hemoclasificador producido en el Centro de Inmunología Molecular es de 2 años con una temperatura de almacenamiento entre 2 y 8 oC. La evaluación que simula las condiciones a la que los usuarios someten a estos reactivos, demostró que el reactivo mantiene las características de calidad que se requieren para su uso. La estabilidad lograda con el Hemo-CIM® Anti-B es similar a la informada con el producto hemoclasificador monoclonal murino Hemo-CIM® Anti-A.

The stability studies of the reagents made from monoclonal antibodies of murine origin allow to establish the life of these products adequately and are an indispensable requisite for the fulfillment of the good practices of production. The hemagglutination methods were used to measure the biological activity of the Anti-B Hemo-CIMâ product expressed in the potency, avidity and intensity against a panel of erythrocytes of the group B and A1B in order to show in a more effective way any deterioration of the reagent. It was established that the useful life of the hemoclassifier produced at the Center of Mollecular Biology is of 2 years at a storage temperature between 2 and 8ºC. The evaluation that simulates the conditions to which the users subject these reagents showed that the reagent maintains the quality characteristics required for its use. The stability attained with the Anti-B Hemo-CIMâ is similiar to that reported with the murine monoclonal Anti-A Hemo-CIMâ hemoclassifier product.

Procedimientos para la obtención de ratones Balb/c hiperinmunes contra el antígeno B del sistema ABO de grupos sanguíneos humanos / Production of Balb-c mice hyperimmunized against B antigen from ABO human blood groups

Los antígenos del sistema ABO de grupos sanguíneos son oligosacáridos presentes en la membrana celular que forman parte de las glicoproteínas y glicolípidos. La introducción de la tecnología de hibridomas murinos para la obtención de anticuerpos monoclonales (AcM) con especificidad para los antígenos ABO ha permitido iniciar en Cuba la producción de reactivos hemoclasificadores basados en AcM. El perfeccionamiento de los reactivos requiere la búsqueda de nuevos clones de hibridomas, para lo que se necesita la sensibilización de ratones Balb/c con los antígenos. Se presentan los resultados de la evaluación de dos vías de inoculación (intraperitoneal e intraesplénica) y tres formas de presentación del antígeno (hematíes completos del grupo B, sustancia específica B y sustancia B tratada con alúmina) en ratones Balb/c a los que se les determinó el título de anticuerpos hemaglutinantes por la técnica de microplacas frente a un panel de hematíes de los grupos A, B y O antes y durante el período de inmunización. La vía intraperitoneal con hematíes completos del grupo B resultó adecuada para alcanzar altos títulos de anticuerpos aglutinantes contra hematíes B, aunque también reaccionaron con los hematíes de otros grupos.